我所单细胞分析研究组(1820组)陆瑶团队在高通量单细胞外囊泡免疫分型研究方面取得新进展,该工作提供了一种单细胞外囊泡多指标检测的研究工具并探讨了其潜在的基础和临床应用价值。该研究发表于综合期刊PNAS (PNAS, 2019, 116 (13) 5979-5984.)。
在本研究中,项目团队利用抗体条形码阵列微流控芯片实现了高通量同一单细胞来源的多种外囊泡的免疫分型;将其应用于口腔鳞癌细胞系及多例口腔鳞癌病人手术组织样本原代细胞,初步发现了肿瘤转移相关的外囊泡亚群;实现了对同一单细胞的分泌蛋白与外囊泡的多指标、并行分析,发现蛋白与外囊泡的分泌由不同的细胞亚群主导(图1)。
图1.高通量单细胞外囊泡免疫分型
A.高通量单细胞外囊泡免疫分型结果原始数据图;B.口腔鳞癌细胞系SCC25单细胞5种外囊泡的检测结果;C.口腔鳞癌细胞(SCC25及两例肿瘤病人原代细胞)根据其单细胞分泌特征可分为数个功能亚群;D. CD63+EV、CD9+CD63+EV外囊泡及IL-8蛋白在各个细胞亚群的分布。
我所单细胞分析研究组(1820组)陆瑶团队与耶鲁大学生物医学工程系Rong Fan教授合作,在单细胞分泌蛋白动态分析方面取得新进展。该研究结果发表于Advanced Science (Advanced Science, 2019, 6, 1801361.)并入选当期内封面(图2).
我们构建了一种高通量、高内涵单细胞分泌蛋白分析平台;利用该平台完成了对同一单细胞在配体刺激前后的蛋白分泌行为进行多时间点测定,实现了高通量同一单细胞(>1000个单细胞)、多组分分泌蛋白(≥10)动态分析;在该平台上模拟人体天然免疫系统在受到细菌感染后的过程,观察同一单细胞免疫响应的发展变化,发现人巨噬细胞的免疫响应与细胞本身的状态密切相关,相关结果也利用单细胞转录组测序进行了验证。
图2.高通量同一单细胞分泌蛋白多时间点分析
高通量(≥5000个单细胞)、高内涵(≥10种分泌蛋白)单细胞分泌蛋白分析原始数据图; B. 1752个同一巨噬细胞单细胞在受LPS刺激后在不同时间点分泌CCL4和TNF蛋白的变化过程。C.相关结果以内封面论文发表。